子生物学実験の基本としての大腸菌希釈培養に関する問題です。2004年三重大。 大腸菌が増殖した池から採取した水1mlを、滅菌した水9mlと混合し、希釈した。 この希釈液1mlを無菌的に取り、別に用意した 滅菌した水9mlと混合し、更に希釈した。 このような方法で希釈を4回行い、一番 最後の希釈液0.2mlを大腸菌用の寒天培地上 に均一に塗り広げた後、培養した。 ↓ ↓ その結果、培地上に大腸菌のcolonyが 33個出現した。colonyとは1個の細菌が 分裂を繰り返し、目に見える集落となった ものである。このcolonyのうち1個を選び 純粋培養したのち、DNAを抽出し分析した。 池の水1ml中の大腸菌数は何個と推定できるか? ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ 答 1.65×10の6乗 33個(塗布時) × 10/0.2(4回目液) × 10/1(3回目液) × 10/1(2回目液) × 10/1(1回目液=池の水) 「池の水→第1回目液」の操作過程では、希釈は行われるが、 他の過程と異なり、全体(10ml)から一部(1mlや0,2ml)を選び 他は捨てて(残して)、次のプロセスに回すことはしていないので 「大腸菌絶対量」は減っていない。「1回目液中の大腸菌数=池の水1mlの大腸菌数」 である。(もう1回10/1を掛けないように注意) なお大腸菌は30分で1回分裂するので 10時間で2の20乗倍。「2の10乗」=1024≒10の3乗 なので 10時間で10の6乗(100万倍) 1個の細胞でも100万個の細胞の塊に増えますと、肉眼でシャーレ上に見えます。 夕方8時(20時)に大腸菌溶液を塗布したシャーレを恒温槽に入れ、研究室を出て家に帰り、翌朝研究室に行くと、きちんとコロニーができていて、実験がスムースに進むわけです。 HPはコチラ! メールでお問い合わせ ▼配信解除はこちら a-sakura-kt@302562.r.just.st ■配信日時 |